KCTD7 - KCTD7
O domínio de tetramerização do canal de potássio contendo 7 é uma proteína em humanos que é codificada pelo gene KCTD7 . O splicing alternativo resulta em múltiplas variantes de transcrição.
Descrição
O gene KCTD7 codifica um membro da família de proteínas contendo o domínio de tetramerização do canal de potássio . Os membros da família são identificados em uma base estrutural e contêm um domínio amino-terminal semelhante ao domínio T1 presente no canal de potássio dependente de voltagem . KCTD7 exibe uma sequência primária e perfil de hidropatia indicando localização intracitoplasmática. A análise do banco de dados EST mostrou que o KCTD7 é expresso no cérebro humano e de camundongo .
Função
A expressão de KCTD7 hiperpolariza a membrana celular e reduz a excitabilidade dos neurônios transfectados em experimentos de patch clamp . O mRNA e a proteína KCTD7 são expressos em neurônios do hipocampo , camadas profundas do córtex cerebral e células de Purkinje do cérebro murino, conforme mostrado por hibridização in situ e experimentos de imunohistoquímica . Ensaios de imunoprecipitação demonstram que KCTD7 é capaz de prudhommerie e interage diretamente com cullin-3 ( CUL3 ), um componente do complexo ubiquitina ligase. Acredita-se que essas interações sejam mediadas por meio do domínio BTB / POZ do KCTD7. No entanto, KCTD7 não mostra nenhuma interação cullin-1 ( CUL1 ). Ensaios de imunoprecipitação também mostram que KCTD7 não interage com Ubiquitin-flag, sugerindo um papel potencial de KCTD7 no complexo ubiquitina ligase sem estar sujeito à uiquitinação. A microscopia de imunofluorescência mostra uma expressão citosólica da proteína GFP -KCTD7 recombinante em células COS-7 transfectadas .
Uma hipótese possível é que o KCTD7 regula indiretamente o nível de expressão da membrana de um canal de potássio . Ao conjugar com o complexo cullin-3 ubiquitin ligase , o KCTD7 pode modular o nível de expressão de um regulador negativo do canal de potássio. Portanto, a superexpressão de KCTD7 em neurônios aumentaria a degradação dessa molécula reguladora levando ao aumento da corrente de potássio através da membrana celular, conforme observado em experimentos de patch clamp.
Em células de hipocampo de camundongo cultivadas, a expressão é encontrada no soma celular, em varicosidades neuríticas ao longo das extensões neuronais em desenvolvimento e em cones de crescimento de neurita, mas não no núcleo. O Kctd7 é amplamente expresso em neurônios em todo o cérebro de camundongo intacto, incluindo neurônios corticais, em camadas de células granulares e piramidais do hipocampo e em células de Purkinje cerebelares. No entanto, nem todas as células neuronais são imunopositivas para Kctd7 e a expressão não é observada em astrócitos ou células microgliais. A expressão é constante de P5 a 2 meses em lisados cerebelares. A superexpressão de KCTD7 em células HeLa e COS-1, que não expressam KCTD7 endógeno, mostra localização citosólica difusa, sem colocalização com marcadores para endossomos, ER, Golgi, lisossomas ou citoesqueleto.
Além do domínio BTB / POZ de KCTD7, outros resíduos são críticos para sua interação adequada com cullin-3. Além disso, uma isoforma Kctd7 de 31 kD de comprimento total é expressa no cérebro de camundongo. Outras bandas imunorreativas principais incluíram uma espécie de 28 kD no baço, fígado e rins, uma espécie de 37 kD nos rins e uma forma de 62 kD provavelmente correspondendo a um dímero estável. A presença de várias bandas era consistente com splicing alternativo e regulação específica do tecido.
Significado clínico
Em 3 membros afetados de uma grande família marroquina consanguínea com epilepsia mioclônica progressiva -3, uma mutação sem sentido homozigótica no gene KCTD7 (R99X) foi identificada.
Em 2 irmãos mexicanos com início infantil de epilepsia mioclônica progressiva e achados patológicos de lipofuscinose ceróide neuronal em vários tipos de células, uma mutação homozigótica no gene KCTD7 (R184C) foi identificada. A mutação foi identificada por sequenciamento de todo o exoma e confirmada por sequenciamento de Sanger . Este fenótipo foi identificado como CLN14. Mutações KCTD7 não foram encontradas em 32 amostras adicionais de CLN.
Referências
Leitura adicional
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Este artigo incorpora texto da Biblioteca Nacional de Medicina dos Estados Unidos , que é de domínio público .