Cultura síncrona - Synchronous culture
Um síncrono ou cultura sincronizados é uma cultura microbiológica ou uma cultura de células que contém células que são todos no mesmo crescimento fase.
Como vários fatores influenciam o ciclo celular (alguns deles estocásticos ), as culturas normais possuem células em todos os estágios do ciclo celular . A obtenção de uma cultura com um estágio do ciclo celular unificado é útil para a pesquisa biológica onde um estágio particular do ciclo celular é desejado (como o cultivo de células parasitadas). Como as células são muito pequenas para certas técnicas de pesquisa, uma cultura síncrona pode ser tratada como uma única célula; o número de células na cultura pode ser facilmente estimado e os resultados experimentais quantitativos podem simplesmente ser divididos no número de células para obter valores que se aplicam a uma única célula. Culturas síncronas têm sido amplamente utilizadas para tratar de questões relacionadas ao ciclo e crescimento celular e aos efeitos de vários fatores sobre eles.
Métodos
Culturas síncronas podem ser obtidas de várias maneiras:
- As condições externas podem ser alteradas, de modo a interromper o crescimento de todas as células na cultura e, em seguida, alteradas novamente para retomar o crescimento. As células recém-crescidas agora estão todas começando a crescer no mesmo estágio e estão sincronizadas. Por exemplo, para células fotossintéticas , a luz pode ser eliminada por várias horas e então reintroduzida. Outro método é eliminar um nutriente essencial do meio de crescimento e, posteriormente, reintroduzi-lo.
- O crescimento celular também pode ser interrompido usando inibidores de crescimento químico . Após o crescimento parar completamente para todas as células, o inibidor pode ser removido da cultura e as células começam a crescer sincronizadamente. O nocodazol , por exemplo, tem sido usado em pesquisas biológicas para sincronização, embora algumas evidências sugiram que ele pode não ter essa capacidade de sincronizar células.
- As células em diferentes estágios de crescimento têm diferentes propriedades físicas. As células em uma cultura podem, portanto, ser fisicamente separadas com base em sua densidade ou tamanho, por exemplo. Isso pode ser conseguido usando centrifugação (para densidade) ou filtração (para tamanho).
- Na técnica Helmstetter-Cummings, uma cultura bacteriana é filtrada através de uma membrana. A maioria das bactérias passa, mas algumas permanecem ligadas à membrana. Meio fresco é então aplicado à membrana e as bactérias ligadas começam a crescer. As bactérias recém-nascidas que se desprendem da membrana agora estão todas no mesmo estágio de crescimento; eles são coletados em um frasco que agora abriga uma cultura sincrônica.