Teste de saliva - Saliva testing
O teste de saliva ou salivaômica é uma técnica de diagnóstico que envolve a análise laboratorial da saliva para identificar marcadores de doenças endócrinas , imunológicas , inflamatórias , infecciosas e outros tipos. A saliva é um fluido biológico útil para avaliar hormônios esteróides , como cortisol , material genético como RNA , proteínas como enzimas e anticorpos e uma variedade de outras substâncias, incluindo metabólitos naturais, incluindo nitrito de saliva, um biomarcador para o status de óxido nítrico (ver abaixo para doenças cardiovasculares, óxido nítrico: um biomarcador salivar para cardio-proteção). O teste de saliva é usado para rastrear ou diagnosticar várias condições e estados de doença, incluindo doença de Cushing , anovulação , HIV , câncer , parasitas , hipogonadismo e alergias . O teste salivar já foi usado pelo governo dos Estados Unidos para avaliar mudanças no ritmo circadiano em astronautas antes do vôo e para avaliar perfis hormonais de soldados em treinamento militar de sobrevivência.
Os defensores dos testes de saliva citam sua facilidade de coleta, segurança, não invasividade, acessibilidade, precisão e capacidade de contornar a punção venosa como as principais vantagens quando comparados aos testes de sangue e outros tipos de testes diagnósticos . Além disso, uma vez que várias amostras podem ser facilmente obtidas, o teste de saliva é particularmente útil para realizar avaliações cronobiológicas que abrangem horas, dias ou semanas. Coletar saliva inteira por meio de baba passiva tem uma miríade de vantagens. A coleta passiva de baba facilita a coleta de grandes tamanhos de amostras. Consequentemente, isso permite que a amostra seja testada para mais de um biomarcador. Também dá ao pesquisador a capacidade de congelar a amostra restante para ser usada posteriormente. Além disso, diminui a possibilidade de contaminação, eliminando dispositivos de coleta extras e a necessidade de induzir o fluxo de saliva.
O uso clínico do teste de saliva ocorreu pelo menos já em 1836 em pacientes com bronquite. O teste de acidez da saliva ocorreu pelo menos já em 1808. O teste de salivação pelo uso de mercúrio foi realizado pelo menos já em 1685.
Estudos mais recentes se concentraram na detecção de hormônios esteróides e anticorpos na saliva. Aplicações recentes enfatizam o desenvolvimento de técnicas cada vez mais sofisticadas para detectar proteínas adicionais, material genético e marcadores de estado nutricional. De acordo com Wong, os cientistas agora estão vendo a saliva como "um biofluido valioso ... com potencial para extrair mais dados do que é possível atualmente com outros métodos de diagnóstico."
Técnica
A maioria dos testes de saliva é realizada usando ensaio de imunoabsorção enzimática (ELISA), reação em cadeia da polimerase (PCR), espectrometria de massa de alta resolução (HRMS) ou qualquer número de novas tecnologias, como detecção baseada em fibra óptica. Todos esses métodos permitem a detecção de moléculas específicas como cortisol , proteína C reativa (CRP) ou IgA secretora . Esse tipo de teste geralmente envolve a coleta de uma pequena quantidade de saliva em um tubo estéril, seguida do processamento em um laboratório remoto. Alguns métodos de teste envolvem a coleta de saliva com um pano absorvente, a aplicação de uma solução química e o monitoramento da mudança de cor para indicar um resultado positivo ou negativo. Este método é comumente usado como uma técnica de ponto de atendimento (POC) para a triagem de HIV. No entanto, o uso de compressas absorventes e soluções químicas pode facilmente distorcer os resultados dos imunoensaios. A pesquisa do Dr. Douglas A. Granger e colegas mostra que os resultados dos biomarcadores de testosterona, DHEA, progesterona e estradiol são elevados quando materiais de coleta à base de algodão são usados em oposição a amostras coletadas por outros métodos (por exemplo, baba passiva). Os pesquisadores estão atualmente examinando o papel cada vez maior do teste de saliva como parte dos exames odontológicos ou de consultório médico de rotina, onde a coleta de saliva é simples de realizar.
Base fisiológica
Os seres humanos têm três glândulas salivares principais : parótida , submandibular e sublingual . Essas glândulas, junto com outras glândulas salivares menores , secretam uma rica mistura de produtos químicos biológicos, eletrólitos , proteínas, material genético, polissacarídeos e outras moléculas. A maioria dessas substâncias entra no ácino da glândula salivar e no sistema de dutos dos capilares circundantes por meio do fluido do tecido intermediário, embora algumas substâncias sejam produzidas dentro das próprias glândulas. O nível de cada componente salivar varia consideravelmente dependendo do estado de saúde do indivíduo e da presença de doenças (bucais ou sistêmicas). Ao medir esses componentes na saliva, é possível rastrear uma variedade de infecções, alergias, distúrbios hormonais e neoplasias .
Uso clínico
As seguintes condições estão entre aquelas que podem ser detectadas por meio de teste de saliva (lista não abrangente): condições adrenais (como doença / síndrome de Cushing e doença de Addison ), estados alterados de hormônios femininos (como síndrome dos ovários policísticos [SOP], menopausa , anovulação e alterações hormonais em mulheres ciclistas), estados hormonais masculinos alterados (como hipogonadismo / andropausa e estados hiperestrogênicos ), distúrbios metabólicos (como resistência à insulina , diabetes e síndrome metabólica ), neoplasias benignas e metastáticas (como câncer de mama , pancreático câncer e câncer oral ), condições infecciosas (como HIV, hepatite viral , amebíase e infecção por helicobacter pylori ) e condições alérgicas (como alergia alimentar ).
Usos em pesquisa comportamental
O teste de saliva também tem usos específicos em ambientes psicológicos clínicos e experimentais . Devido à sua capacidade de fornecer informações sobre o comportamento, as emoções e o desenvolvimento humanos, tem sido usado para investigar fenômenos psicológicos como ansiedade , depressão , PTSD e outros transtornos comportamentais. Seu objetivo principal é testar os níveis de cortisol e alfa amilase , que são indicativos de níveis de estresse. O cortisol salivar é um bom índice de estresse, com níveis aumentados de cortisol correlacionando-se positivamente com níveis aumentados de estresse. Os níveis de cortisol aumentam lentamente com o tempo e demoram um pouco para retornar ao nível básico, indicando que o cortisol está mais associado aos níveis de estresse crônico . A alfa amilase, por outro lado, aumenta rapidamente quando confrontada com um estressor e retorna à linha de base logo após o estresse passar, tornando a medição da amilase salivar uma ferramenta poderosa para pesquisas psicológicas que estudam as respostas ao estresse agudo. As amostras são geralmente coletadas dos participantes fazendo-os babar por um canudo em um tubo de coleta enquanto experimentam um estímulo, com amostras colhidas a cada poucos minutos para registrar a mudança gradual nos níveis de hormônio do estresse. Como a coleta de amostras de saliva não é invasiva, ela tem a vantagem de não introduzir mais estresse no participante, o que pode distorcer os resultados.
Em estudos mais específicos observando a ligação entre os níveis de cortisol e fenômenos psicológicos, foi descoberto que estressores crônicos, como situações de risco de vida (por exemplo: doenças), depressão e dificuldades sociais ou econômicas se correlacionam com níveis de cortisol significativamente mais elevados. Em situações em que um sujeito sofre ansiedade induzida, níveis elevados de cortisol correspondem a sintomas mais fisiológicos de nervosismo, como aumento da frequência cardíaca, suor e condutância da pele . Além disso, uma correlação negativa foi descoberta entre os níveis basais de cortisol e agressão. Os níveis de cortisol salivar podem, portanto, fornecer informações sobre vários outros processos psicológicos.
Os níveis de alfa amilase na saliva fornecem uma maneira não invasiva de examinar a atividade medular simpatoadrenal (SAM), que pode ser medida com equipamento eletrofisiológico ou leituras de plasma sanguíneo . Foi descoberto que os níveis de alfa amilase salivar se correlacionam com os níveis elevados de atividade do sistema nervoso autônomo , reagindo de maneira semelhante ao hormônio norepinefrina . As descobertas subsequentes revelam uma relação entre α-amilase e competição. Os resultados mostraram que os níveis de alfa amilase mudaram ao reagir à competição, mas não ao antecipá-la. Além disso, ao testar os níveis de alfa amilase, os cientistas notaram uma diferença no comportamento de reatividade entre indivíduos com experiência anterior em uma situação semelhante.
Embora o teste de saliva tenha a promessa de se tornar uma ferramenta valiosa e mais amplamente usada na pesquisa psicológica no futuro, também existem algumas desvantagens do método que devem ser mantidas em mente, incluindo o custo de coleta e processamento das amostras e a confiabilidade do a própria medida. Há uma quantidade substancial de variabilidade nos níveis de cortisol, tanto dentro quanto entre pessoas, que deve ser levada em consideração ao se tirar conclusões de estudos.
Muitos estudos foram realizados para examinar melhor as variáveis que contribuem para essas variações dentro e entre as pessoas. As análises das variáveis que afetam os níveis de cortisol geraram uma extensa lista de variáveis de confusão.
A variação diurna é um fator importante para a variação dentro da pessoa, porque os níveis basais de cortisol são conhecidos por diferirem com base na hora do dia. Para indivíduos com desenvolvimento normal que seguem um esquema típico de dia e noite, a produção de cortisol atinge o pico durante as últimas horas de sono. Acredita-se que esse pico ajude a preparar o corpo para a ação e estimule o apetite ao acordar. A variação diurna também é afetada por condições psicológicas. Por exemplo, descobriu-se que os níveis de cortisol matinal estão elevados em crianças tímidas e os níveis noturnos aumentam em adolescentes deprimidos, especialmente entre as duas e as quatro da tarde. Isso pode ser importante para compreender as emoções e os sintomas depressivos.
Outras variáveis que afetam a variação dentro e entre pessoas estão listadas abaixo. A lista não pretende ser abrangente e o impacto de muitas dessas variáveis poderia se beneficiar de pesquisas e discussões futuras.
- A idade é um dos principais fatores para a variação entre pessoas. Alguns estudos indicam que crianças e adolescentes apresentam maior atividade do cortisol potencialmente relacionada ao desenvolvimento.
- Descobriu-se que o gênero influencia os níveis básicos de cortisol, contribuindo para a variação entre as pessoas. Em situações geralmente estressantes, descobriu-se que os níveis de cortisol nos homens aumentam quase o dobro em comparação com as mulheres. Em situações sociais estressantes (ou seja, desafio de rejeição social), no entanto, as mulheres, mas não os homens, tendem a apresentar níveis significativamente mais elevados de cortisol.
- O ciclo menstrual foi encontrado a níveis de impacto de cortisol no corpo, impactando tanto intra- e variação entre-pessoa. As mulheres na fase lútea têm níveis de cortisol iguais aos dos homens, sugerindo que não há diferenças sexuais nos níveis de base do cortical quando as mulheres não estão ovulando. Mulheres na fase folicular e mulheres em uso de anticoncepcionais orais têm níveis significativamente mais baixos de cortisol quando comparadas a homens e mulheres na fase lútea.
- Foi descoberto que a gravidez aumenta os níveis de cortisol no corpo. Em particular, descobriu -se que a amamentação diminui os níveis de cortisol a curto prazo, mesmo se a mãe for exposta a um estressor psicossocial.
- A nicotina é conhecida por aumentar os níveis de cortisol no corpo, uma vez que estimula o eixo HPA . Depois de pelo menos dois cigarros, os fumantes apresentam elevações significativas dos níveis de cortisol salivar. Além disso, os fumantes habituais apresentam respostas embotadas do cortisol salivar aos estressores psicológicos.
- Foi descoberto que os alimentos afetam os níveis de cortisol. Foi descoberto que a presença de proteínas aumenta o cortisol. Esta variável é freqüentemente afetada pela variação diurna, com o cortisol sendo notavelmente mais alto durante a hora do almoço do que na hora do jantar, e sexo, com as mulheres tendo níveis mais altos de cortisol depois de comer do que os homens.
- Embora alguns estudos que examinaram os efeitos do consumo de álcool e da ingestão de cafeína sobre os níveis básicos de cortisol tenham encontrado correlações positivas, os resultados são mistos e se beneficiariam de um exame mais aprofundado.
- Exercícios intensos ou prolongados podem resultar em níveis aumentados de cortisol. O exercício de curta duração e de baixo nível aumenta apenas ligeiramente os níveis de cortisol.
- A exposição repetida a estímulos inicialmente estressantes resultou em um nivelamento do cortisol no corpo.
- Foi demonstrado que o peso ao nascer está inversamente relacionado aos níveis básicos de cortisol; o baixo peso ao nascer está correlacionado com altos níveis de cortisol.
- Foi descoberto que a posição dentro de uma hierarquia social afeta os níveis de cortisol. Um estudo em particular analisou uma amostra de 63 recrutas do exército e descobriu que indivíduos socialmente dominantes mostraram altos aumentos de cortisol salivar em comparação a apenas elevações modestas em homens subordinados após exposição ao estresse e exercícios físicos.
- Alguns medicamentos (por exemplo , glicocorticóides , drogas psicoativas , antidepressivos ) foram encontrados para afetar os níveis de cortisol no corpo, mas os resultados dos estudos que examinam esses efeitos foram mistos. O impacto dos medicamentos nos níveis corticais pode se beneficiar de pesquisas futuras.
Evidências e pesquisas atuais
Aberrações de cortisol e melatonina
Em 2008, a Endocrine Society publicou diretrizes diagnósticas para a síndrome de Cushing, nas quais recomendou o teste de cortisol salivar à meia-noite em dois dias consecutivos como uma possível ferramenta de triagem inicial. Uma revisão de 2009 concluiu que o teste de cortisol salivar noturno é uma alternativa adequada ao teste de cortisol sérico para diagnosticar a síndrome de Cushing, relatando que tanto a sensibilidade quanto a especificidade ultrapassaram noventa por cento. Em 2010, Sakihara, et al ., Avaliaram a utilidade e precisão dos níveis de cortisol salivar, plasmático e urinário e determinaram que o cortisol salivar é o “método de escolha” para o rastreamento da síndrome de Cushing. Em 2008, Restituto, et al ., Descobriram que o cortisol salivar matinal é “tão bom quanto o soro” como uma técnica de rastreamento da doença de Addison . Em 2010, Bagcim et al ., Determinaram que os níveis de melatonina na saliva “refletem os do soro a qualquer hora do dia” e são uma alternativa confiável à melatonina sérica para estudar a fisiologia pineal em recém-nascidos. Um artigo de revisão de 2008 descreveu o teste de melatonina na saliva como um “método prático e confiável para ensaios de campo, clínicos e de pesquisa”.
Irregularidades hormonais reprodutivas
Um estudo de 2009 examinou o uso de testes de saliva para medir os níveis de estradiol , progesterona , dehidroepiandrosterona (DHEA) e testosterona em 2.722 indivíduos (homens e mulheres). Os pesquisadores confirmaram a “boa validade das medições dos hormônios sexuais [salivares]” e concluíram que o teste salivar era um bom método para testar adultos mais velhos devido à facilidade de coleta em casa.
No entanto, outros estudos sugerem que esses testes não representam a quantidade de hormônios no sangue ou sua atividade biológica . O teste de saliva é frequentemente usado como parte da terapia de reposição hormonal bioidêntica , embora tenha sido criticado por ser caro, desnecessário e sem sentido.
Fêmea
Em 2010, um estudo identificou o hormônio luteinizante (LH) como um biomarcador salivar preciso da ovulação em mulheres. Os pesquisadores mediram vários hormônios na saliva ao longo do ciclo menstrual e descobriram que o hormônio luteinizante salivar estava elevado de forma confiável durante o período ovulatório e, por esse motivo, "o nível de LH salivar é uma forma confiável de determinar a ovulação". Um estudo de 1983 de vários testes de esteróides salivares mostrou que as medições diárias de progesterona salivar “fornecem um meio valioso de avaliar a função ovariana”. Um estudo de 2001 envolveu a coleta diária de saliva de indivíduos saudáveis e sua plotagem ao longo de todo o ciclo menstrual. Os pesquisadores determinaram que as curvas salivares de estradiol e progesterona correspondiam aos perfis diários normalmente observados no sangue, embora em menor amplitude. Em 1999, os pesquisadores determinaram que o teste de saliva baseado em ELISA “pode servir como um método confiável para a determinação de estriol”. Um artigo de 2007 relatou que a dosagem de testosterona livre, inclusive por meio de ensaio de saliva, representa "o marcador bioquímico mais sensível que apóia o diagnóstico de SOP". Em 1990, Vuorento, et al., Descobriram que os defeitos da fase lútea, em que os níveis de progesterona diminuem prematuramente dentro do ciclo menstrual, foram identificados com alta frequência usando teste de progesterona salivar entre mulheres que sofrem de fertilidade inexplicada.
Masculino
Em 2009, Shibayama, et al., Examinou a precisão da medição de andrógeno salivar para o diagnóstico de hipogonadismo de início tardio (declínio relacionado à idade em andrógenos , freqüentemente chamado de "andropausa"). Os pesquisadores determinaram que a precisão da dosagem de testosterona na saliva e DHEA excedeu 98,5% e que este método "tem aplicabilidade satisfatória" no diagnóstico de hipogonadismo de início tardio. Um estudo de 2007 relatou uma sensibilidade e especificidade de 100% para a testosterona salivar ao descartar o hipogonadismo e concluiu que a testosterona salivar é um biomarcador útil no diagnóstico da deficiência androgênica masculina. O uso de testosterona salivar para triagem de hipogonadismo foi validado por outros estudos, incluindo um envolvendo 1454 indivíduos. Esses pesquisadores concluíram que a testosterona salivar é "um ensaio aceitável para o rastreamento de hipogonadismo".
Condições neoplásicas
Câncer de pâncreas
Um estudo de 2010 por Zhang, et al., Demonstrou que os pesquisadores foram capazes de detectar o câncer de pâncreas com alta sensibilidade e especificidade (90,0% e 95,0%, respectivamente) ao rastrear a saliva para quatro biomarcadores de mRNA específicos . Em um artigo de revisão de 2011 que examinou biomarcadores de câncer de pâncreas , Hamade e Shimosegawa concluíram que a aplicação clínica do teste de biomarcador de saliva é "benéfica para o rastreamento e detecção precoce de câncer de pâncreas".
Câncer de mama
Em 2008, Emekli-Alturfan, et al., Comparou a saliva de pacientes com câncer de mama com a de indivíduos saudáveis e observou, notavelmente, que as amostras de pacientes com câncer de mama continham células displásicas e peróxidos lipídicos reduzidos . Um estudo de 2000 comparou os níveis salivares de um marcador de câncer de mama (HER2 / neu) em mulheres saudáveis, mulheres com lesões benignas na mama e mulheres com câncer de mama. Os pesquisadores descobriram que o nível salivar (assim como sérico) desse marcador era significativamente mais alto em mulheres com câncer de mama do que em mulheres saudáveis e com lesões benignas na mama; eles afirmaram que o marcador pode ter potencial como uma ferramenta para diagnosticar o câncer de mama ou detectar sua recorrência. Um estudo separado corroborou esses achados e demonstrou ainda que outro marcador de câncer de mama (CA15-3) foi elevado, enquanto a proteína supressora de tumor p53 foi reduzida na saliva de mulheres com câncer de mama em comparação com controles saudáveis e mulheres com lesões benignas da mama.
Câncer oral
Em 2010, Jou, et al., Descobriram que os pacientes com diagnóstico de carcinoma de células escamosas oral tinham níveis elevados de transferrina na saliva em comparação com controles saudáveis e, além disso, que a medição da transferrina salivar usando a técnica de ELISA era "altamente específica, sensível e precisa para os primeiros detecção de câncer oral. ” Um estudo de 2009 relatou que os níveis de dois biomarcadores, Cyclin D1 (aumentou em comparação com os controles) e Maspin (diminuiu em comparação com os controles), tiveram sensibilidades e especificidades de 100% para detecção de câncer oral quando medidos na saliva. Foi descoberto que o teste de saliva para mRNAs específicos possui um potencial significativo para o diagnóstico de câncer oral . Na verdade, há evidências que sugerem que os diagnósticos de RNA da saliva são ligeiramente superiores aos diagnósticos de RNA do soro, com o valor comparativo da característica operacional do receptor (ROC) sendo 95% para a saliva, mas apenas 88% para o soro.
Desregulação de glicose
Um estudo de 2009 comparou os níveis de glicose na saliva de pacientes diabéticos aos de controles não diabéticos. Os autores relataram que “a concentração e a excreção salivar [glicose] eram muito maiores em pacientes diabéticos do que em indivíduos controle”. Em 2009, Rao, et al., Investigaram biomarcadores salivares que poderiam ajudar na identificação de indivíduos diabéticos tipo 2 . Os pesquisadores descobriram que sessenta e cinco proteínas, a maioria das quais estão envolvidas na regulação do metabolismo e da resposta imune, foram significativamente alteradas em diabéticos tipo 2. Eles observaram ainda que o aumento relativo dessas proteínas específicas era diretamente proporcional à gravidade da doença (ou seja, elas estavam um tanto elevadas em pré-diabéticos e significativamente elevadas em diabéticos). Em 2010, Soell, et al., Determinou que um biomarcador salivar particular (cromogranina A) foi superexpresso em 100% dos pacientes diabéticos quando comparados aos controles. Em 2010, Qvarnstrom, et al., Conduziu uma análise transversal de 500 indivíduos e descobriu que um aumento na lisozima salivar estava “significativamente associado à síndrome metabólica”.
Condições infecciosas
Vírus da imunodeficiência humana
A precisão do teste de anticorpos anti-HIV da saliva foi demonstrada em vários estudos; dois estudos recentes de grande escala descobriram que a sensibilidade e a especificidade são de 100%. O primeiro deles foi publicado em 2008 por Zelin, et al., E comparou o teste de anticorpos na saliva e o teste de anticorpos no soro usando a técnica ELISA em 820 indivíduos. O segundo estudo, conduzido por Pascoe, et al., Comparou o teste de anticorpos na saliva com o teste de anticorpos no soro usando ELISA seguido por análise confirmatória de Western Blot em 591 indivíduos. A precisão do teste de anticorpos anti-HIV da saliva foi confirmada por muitos estudos adicionais, levando à aprovação desse método pela Food & Drug Administration dos EUA em 2004.
Hepatite viral
Vários estudos demonstraram potencial diagnóstico para teste de hepatite salivar. Um estudo de 2011 demonstrou que o teste de saliva do antígeno de superfície do HBV usando ELISA teve uma sensibilidade e especificidade de 93,6% e 92,6%, respectivamente. Outros estudos descobriram que o ensaio de saliva para anticorpos anti-HAV ( IgM e IgG ) foi um método eficaz para identificar indivíduos infectados com HAV . A hepatite C também foi identificada usando métodos de detecção de saliva. Yaari, et al., Relataram em 2006 que o teste de saliva para anticorpos anti-HCV produziu uma sensibilidade de 100% e uma especificidade que foi “semelhante ou melhor” quando comparado ao teste de soro.
Infecção parasitária
Um estudo de 2010 descobriu que a detecção baseada na saliva do parasita Entamoeba histolytica foi superior aos métodos de detecção fecal existentes para pacientes com abscesso hepático associado a E. histolytica . Em 2004, El Hamshary e Arafa descobriram aquele anti-E salivar. A concentração de IgA histolytica teve “valor diagnóstico preditivo de amebíase intestinal ... bem como na amebíase tecidual”. Um estudo de 1990 que envolveu testes de saliva para E. histolytica em 223 crianças em idade escolar demonstrou uma sensibilidade e especificidade de 85% e 98%, respectivamente. Em 2005, Stroehle, et al., Determinou que a detecção de anticorpos IgG contra Toxoplasma gondii na saliva tinha uma sensibilidade e especificidade de 98,5% e 100%, respectivamente. Um estudo publicado em 1990 demonstrou a utilidade diagnóstica do teste de IgG na saliva na identificação de neurocisticercose secundária a Taenia solium .
Infecção por Helicobacter pylori
Em um estudo de 2005, os pesquisadores investigaram a precisão do diagnóstico do Helicobacter pylori em pacientes dispépticos usando níveis salivares de IgG anti- H. pylori . Eles determinaram que o teste de saliva para anticorpos de H. pylori “poderia ser usado de forma confiável para a triagem de pacientes dispépticos na prática geral”. Naquele mesmo ano, Tiwari, et al., Examinaram a precisão do teste de saliva para DNA de H. pylori e quão bem isso se correlacionou com a presença de H. pylori detectada por biópsia gástrica. Com base em seus resultados, os pesquisadores concluíram que o teste de saliva pode servir como um método de detecção não invasivo confiável para a infecção por H. pylori .
Periodontite
Um estudo de 2009 conduzido por Koss, et al., Estudou biomarcadores salivares de doença periodontal ; seus resultados revelaram que três substâncias ( peroxidase , hidroxiprolina e cálcio ) foram significativamente aumentadas na saliva de pacientes com periodontite . Um estudo de 2010 descobriu que a elevação de três biomarcadores de saliva (MMP-8, TIMP-1 e ICTP), particularmente quando analisado por ensaio imunofluorométrico resolvido no tempo, era sugestivo de periodontite.
Doença cardiovascular
CRP: um biomarcador salivar para risco cardiovascular
Em 2011, Punyadeera, et al., Estudaram “a utilidade clínica dos níveis de proteína C reativa salivar na avaliação de eventos coronários, como infarto do miocárdio em um ambiente de atenção primária à saúde”. Os pesquisadores descobriram que os níveis de PCR na saliva em pacientes cardíacos eram significativamente mais elevados quando comparados a controles saudáveis. Além disso, eles descobriram que a PCR da saliva estava correlacionada com a PCR do soro em pacientes cardíacos e, portanto, poderia ser uma ferramenta útil para “grandes estudos de triagem de pacientes para avaliação de risco de eventos coronários”.
Óxido nítrico: um biomarcador salivar para proteção cardiovascular
O óxido nítrico cardio-protetor é gerado no corpo por uma família de enzimas específicas, a óxido nítrico sintase . Uma via alternativa para a geração de óxido nítrico é a via nitrato-nitrito-óxido nítrico, na qual o nitrato inorgânico da dieta é sequencialmente reduzido a óxido nítrico . Uma etapa necessária e obrigatória na geração de óxido nítrico pela sintase de óxido não nítrico ou via alternativa envolve a absorção de nitrato pela glândula salivar , excreção na saliva e subsequente redução a nitrito por bactérias comensais orais na boca.
O nitrito salivar é então quimicamente reduzido no sangue e tecido a óxido nítrico, resultando na redução da pressão sanguínea , inibição da agregação plaquetária, aumento do fluxo sanguíneo cerebral e dilatação mediada pelo fluxo e diminuição do custo do oxigênio durante o exercício. A principal fonte de nitrato inorgânico na dieta, que é reduzido a óxido nítrico no corpo, são os vegetais de folhas verdes. Os efeitos de redução da pressão arterial de vegetais verdes folhosos, em particular, espinafre e rúcula , são abundantes em dietas anti-hipertensivas, como a dieta DASH . Vários artigos mostraram que os níveis de nitrito na saliva se correlacionam com os níveis de nitrito no sangue , os quais servem como substitutos significativos para os efeitos de redução da pressão arterial.
Sobko et al. mostra que as dietas tradicionais japonesas ricas em vegetais folhosos aumentaram os níveis de nitrito no plasma e na saliva com uma diminuição correspondente na pressão arterial .
Webb et al. em 2008 reforçou o papel obrigatório da saliva em humanos para gerar óxido nítrico . Aqui, eles mostraram a ingestão de suco de beterraba, um alimento rico em nitrato, por voluntários saudáveis, reduzindo significativamente a pressão arterial e interrompendo a saliva, cuspindo ou interrompendo a bioconversão de nitrato dietético em nitrito na boca com enxaguatório bucal antibacteriano, o produto químico a redução de nitrato em nitrito em óxido nítrico com uma diminuição associada na pressão arterial foi abatida. Ao bloquear a recirculação da saliva ou impedir que o nitrato salivar seja quimicamente reduzido a nitrito, evitou um aumento nos níveis de nitrito plasmático e bloqueou uma diminuição na pressão arterial, bem como aboliu a inibição mediada pelo óxido nítrico da agregação de plaquetas, confirmando os efeitos cardioprotetores foram atribuíveis ao óxido nítrico por meio da conversão de nitrato em nitrito na saliva.
Em uma série de relatórios de Ahluwalia e colegas, eles mostraram em um protocolo cruzado de 14 voluntários que ingeriram nitratos inorgânicos, o nível de nitrito plasmático e salivar aumentou 3 horas após a ingestão com uma redução significativa da pressão arterial . O nitrato extraído do sangue pela glândula salivar, acumula-se na saliva, que é então reduzido a óxido nítrico para ter um efeito direto de redução da pressão arterial. A diminuição do nitrito de saliva em voluntários que já apresentavam níveis elevados resultou em aumento da pressão arterial sistólica e diastólica . Além disso, os pré-hipertensos podem ser mais sensíveis aos efeitos de redução da pressão arterial da via dietética do nitrato-nitrito-óxido nítrico. O monitoramento da bioconversão de nitrato derivado de planta em nitrito salivar serve como um biomarcador substituto para o status de óxido nítrico corporal total.
Estados alérgicos
Um estudo de 2002 explorou a relação entre alergias e níveis de imunoglobulina salivar em oitenta indivíduos. Os pesquisadores demonstraram uma associação entre o desenvolvimento de alergias e distúrbios nos níveis de IgA alérgeno específico da saliva (elevados em comparação com os controles) e IgA secretora total (reduzida em comparação com os controles). Em 2011, Peeters, et al., Identificou aberrações características em certos metabólitos salivares que estavam associados a indivíduos alérgicos ao amendoim quando comparados a controles tolerantes ao amendoim. Em 2003, Vojdani, et al., Descobriram que os indivíduos expostos a vários fungos alergênicos e micotoxinas exibiam “níveis significativamente mais elevados de anticorpos IgA salivares contra uma ou mais espécies de fungos”.
Substancias químicas
Em 2009, Pink, et al., Relataram que o teste de saliva se tornou tão difundido que começou a substituir o teste de urina como o padrão para detectar drogas ilícitas e medicamentos prescritos. Shin, et al., Relatou em 2008 que a detecção salivar de etanol e três de seus metabólitos ( metanol , etilenoglicol e dietilenoglicol ) tinha “sensibilidade e especificidade relativamente altas” e que tal teste facilita o diagnóstico rápido de intoxicação por álcool. Um estudo de 2002 demonstrou que houve uma boa concordância entre a saliva e a análise de etanol no ar expirado, e que o ensaio cromatográfico de etanol na saliva é "específico ... [e] mostra boa exatidão e precisão". Em 2011, Vindenes, et al., Investigou a viabilidade do monitoramento do uso de drogas pela saliva, comparando esse método à detecção de drogas na urina. Os pesquisadores descobriram que vários metabólitos de drogas foram detectados com mais frequência na saliva do que na urina; isso era verdade para 6-monoacetilmorfina , anfetamina , metanfetamina e N-desmetildiazepam. Esse mesmo estudo mostrou que o teste de saliva também pode detectar outros metabólitos de drogas, embora não com tanta frequência quanto o teste de urina; este foi o caso da morfina, outros benzodiazepínicos , cannabis e cocaína .
Crítica selecionada
Sensibilidade e especificidade
Uma crítica frequentemente citada ao uso da saliva como fluido diagnóstico é que os biomarcadores estão presentes em quantidades muito baixas para serem detectados de forma confiável. Como Wong aponta, no entanto, isso “não é mais uma limitação” devido ao desenvolvimento de técnicas de detecção cada vez mais sensíveis. Avanços em ELISA e espectrometria de massa, além do surgimento de novos métodos de detecção que tiram proveito da nanotecnologia e outras tecnologias, estão permitindo que cientistas e profissionais alcancem alta sensibilidade ao analito.
A especificidade do biomarcador é outra consideração com o teste de saliva, tanto quanto com o teste de sangue ou urina. Muitos biomarcadores são inespecíficos (por exemplo, a PCR é um marcador inflamatório inespecífico) e, portanto, não podem ser usados sozinhos para diagnosticar nenhuma doença em particular. Esse problema está sendo tratado atualmente por meio da identificação de vários biomarcadores que são correlativos de uma doença; eles podem então ser rastreados concomitantemente para criar um painel abrangente de testes que aumenta significativamente a especificidade do diagnóstico. É importante notar que certos tipos de teste de saliva são considerados por muitos como mais específicos do que o teste de sangue; isso é particularmente verdadeiro para os hormônios esteróides. Como os testes de hormônios salivares medem apenas os hormônios que não estão ligados à globulina ligadora de hormônios sexuais (SHBG) ou albumina , eles são considerados como refletindo apenas a fração bioativa (“livre”). Com a pesquisa contínua no campo dos testes salivares, os parâmetros de precisão, como sensibilidade e especificidade, continuarão a melhorar.
estandardização
Tal como acontece com outros métodos de teste de diagnóstico, uma desvantagem do teste de saliva é a variabilidade que existe entre os dispositivos de diagnóstico e técnicas de análise laboratorial, especialmente para medir hormônios. Consequentemente, embora um resultado de teste possa ser preciso e confiável dentro de um determinado método de ensaio ou laboratório, ele pode não ser comparativo a um resultado de teste obtido usando um método ou laboratório diferente. Como a comunidade de pesquisa continua a validar e refinar os métodos de teste e estabelecer intervalos de diagnóstico padrão para vários biomarcadores de saliva, esse problema deve ser resolvido. Recentemente, o Instituto Nacional de Saúde e Serviço de Saúde Pública dos Estados Unidos concedeu financiamento significativo para avanços adicionais nos testes salivares, incluindo o desenvolvimento contínuo de padrões de diagnóstico.
Veja também
Referências
Leitura adicional
- Wong, DT (março de 2006). "Diagnósticos salivares movidos por nanotecnologias, proteômica e genômica" . Journal of the American Dental Association . 137 (3): 313–21. doi : 10.14219 / jada.archive.2006.0180 . PMID 16570464 .